重组人CD22单抗隆抗体SM03对人B细胞非霍奇金淋巴瘤细胞株的体外抑瘤作用以及抑瘤机制的实验研究

【作者】 张东生； 孙健； 丁娅； 李苏； 夏忠军； 黄慧强； 徐瑞华； 姜文奇；

【机构】 中山大学肿瘤防治中心内科；

【摘要】 目的:研究重组人CD22单克隆抗体(SM03)对B细胞非霍奇金淋巴瘤细胞株的体外生长抑制作用,探讨PI3K信号传导凋亡通路在SM03抗人B细胞淋巴瘤中的作用。方法:选择B细胞淋巴瘤细胞株Raji和Ramos细胞株,流式细胞仪检测Raji和Ramos细胞的CD22抗原表达量,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和周期分布;采用CCK-8法测定SM03对Ramos和Raji细胞生长抑制作用;并采用Western blot法检测Raji和Ramos细胞株Bcl-2、Bax、Bcl-xL、Mcl-1、Akt及p-Akt蛋白的表达情况。结果:SM03对Raji和Ramos细胞株的体外抑瘤作用均较弱。SM03在0-400μg/ml浓度范围内对Raji细胞的抑制率为26.18～31.84%,平均值为30.64±3.26%,SM03在0-400μg/ml浓度范围内对Ramos细胞的抑制率为2.67～22.47%,平均值为11.93±9.96%。SM03在25、50、1OOμg/ml的剂量下并不引起Ramos细胞的凋亡,亚G1期细胞所占的比例分别为1.6%、2.O%、1.8%和2.2%;SM03在25、50、100μg/ml的剂量能引起Raji细胞的凋亡,亚G1期细胞所占的比例分别为4.6%、6.9%、13.7%和17.6%:相同条件下均未能对两种细胞的周期分布产生影响。在Ramos细胞中未检测到Bcl-2蛋白的表达;p-Akt蛋白在两株细胞中均未检测到表达;SM03未能对Bcl-2家族蛋白(Bax、Bcl-2、Bcl-xL及Mcl-1蛋白)在Ramos和Raji细胞的表达产生影响;Akt蛋白在Raji细胞中观察到随SM03剂量的增加其表达量逐渐减少;Akt蛋白在Ramos细胞中未检测明显的变化。结论:SM03体外对B细胞淋巴瘤细胞株的抑瘤作用较弱。在25、50、100μg/ml的剂量能引起Raji细胞的凋亡,并能抑制Akt蛋白的表达,但对p-Akt并不产生影响,对Bcl-2家族蛋白表达不产生影响。SM03不通过PI3K/Akt信号通路和Bcl-2家族蛋白凋亡途径诱导Raji细胞的凋亡。更多还原