儿童急性非淋巴细胞白血病耐药相关基因的表达及与WAVE1基因的相关性

【作者】 杨明华； 赵明一； 贺钰磊； 汪敏慧； 王卓； 谢岷； 吴秀山； 曹励之；

【机构】 中南大学湘雅医院儿科； 湖南师范大学生命科学院；

【摘要】 目的:探讨儿童急性非淋巴细胞白细胞(AML)中WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVE1)基因参与多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(MRP)、肺耐药相关蛋白基因(MVP)、乳腺癌耐药蛋白基因(BCRP)表达和调控的机制。方法:应用实时定量PCR(RQ-PCR)法和蛋白印迹(Western blotting)分别检测52例AML患儿治疗前及疾病发展过程中BMMCs中WAVE1,MDR1,MRP1,LRP及BCRPmRNA和蛋白的表达水平。将PCDNA3.1A-WAVE1真核表达质粒转染HL60细胞构建WAVE1高表达HL-60细胞,将WAVE1基因的特异性小片段干扰RNA(WAVE1 SiRNA)转染HL-60/ADR低表达细胞;Western blot和RQ-PCR法检测基因转染前后白血病细胞系WAVE1,MRP1及BCRP基因及蛋白的表达水平。结果:复发/难治组病例的WAVE1及耐药相关基因水平明显高于缓解组患儿(P<0.05),同一患儿的患儿初治及复发时的WAVE1基因水平明显高于缓解期表达水平(P<0.05);与HL60细胞相比较,HL60/ADR细胞WAVE1 mRNA及蛋白表达水平均明显增加;转染WAVE1后HL60细胞系MRP1及BCRP基因和蛋白表达水平均有不同程度的表达增加,而转染WAVE1 siRNA的HL60/ADR细胞MRP1及BCRP基因的表达水平比转染前明显降低。结论:WAVE1与儿童AML的病程及预后相关,WAVE1参与了髓系白细胞细胞多药耐药的形成并可影响多个重要的耐药相关基因的表达和作用。更多还原