产聚乙烯醇降解酶的培养条件

【作者】 张颖； 李寅； 华兆哲； 陈坚；

【机构】 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院生物系统与生物加工工程研究室；

【摘要】 放线菌S treptom yces venezuelae GY1产生的聚乙烯醇(PVA)降解酶是一种诱导酶.以4种不同类型的PVA为唯一碳源时,该菌株单位质量细胞产酶能力比以糖类物质为唯一碳源时提高10倍以上.聚合度和醇解度最高的PVA1799是该菌株产生PVA降解酶的适宜底物,其浓度为1 gL-1时,PVA降解酶的产量为120 u/g(细胞).培养基中PVA1799浓度由1 gL-1上升到5 g L-1时,该菌株单位质量细胞产酶能力下降73%,表明PVA1799浓度过高会抑制产酶.GY1菌株产酶的最适温度和pH分别为30℃和7.0.在GY1菌株生长过程中控制以下条件有利于产生PVA降解酶:(1)保持培养体系中较高的溶氧水平;(2)在氮源中补充NO-3;(3)在一定浓度范围内添加MgSO4·7H2O、CaCl2、MnSO4、BaCl2、ZnSO4、FeSO4.7H2O和CuSO4等金属盐.Pseudom onas sp.产生的PVA降解酶能够作用伯醇或仲醇类化合物,以这些伯醇或仲醇类化合物代替培养基中的PVA,不能诱导GY1菌株产生PVA降解酶;而在培养基中有PVA存在时,再添加0.5 g L-1的32戊醇和环己醇能够明显促进PVA降解酶的产生(单位质量细胞产酶能力分别提高了21%和32%).图8表1参10更多还原