蝰蛇C-型凝集素通过膜受体GPIb激活血小板

【作者】 吴健波； 钟树荣； 李瑞； 朱绍文； 王婉瑜； 熊郁良； 吕秋敏；

【机构】 中国科学院昆明动物研究所；

【摘要】 目的:蛇毒C-型凝集素是研究血小板受体和功能的重要研究工具。本文研究从蝰蛇(Daboia russellii siamensis)蛇毒中分离纯化得到一个新的C-型凝聚素dabocetin对血小板的激活作用。方法:运用离子交换和分子筛等从蝰蛇蛇毒中纯化dabocetin。同时测定它的部分一级结构。利用dabocetin亲和柱和相关抑制剂研究dabacetin在血小板膜上的受体。另外检测dabocetin诱导的血小板激活中蛋白磷酸化的变化。结果和结论:通过DEAE A-50和Resource Q柱从蝰蛇中纯化到一个可以激活血小板的组分。N-末端序列测定表明,它属于蛇毒C-型凝集素家族。还原电泳表明它是由两条分子量分别是13 kDa和12 kDa的亚基组成。非还原电泳中它的分子量是子量是52 kDa。推测它的结构是α2β2结构。Dabocetin可以诱导人血小板聚集。血小板膜受体GPIb的抗体可以抑制它的聚集活性。同时,dabocetin亲和层析分离到血小板膜受体GPIb复合物,而不是GPVI复合物。证明dabocetin可以结合血小板膜受体GPIb,从而引起血小板的激活。Dabocetin引起的血小板激活信号传导包括了Src,Syk,LAT和PLCγ2的磷酸化,说明这些磷酸化在dabocetin诱导的血小板聚集中有重要作用。更多还原