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半矮生桃基因组DNA提取及SSR-PCR反应体系的优化
【作者】 韩世明； 王志强； 牛良； 鲁振华； 刘淑娥； 宋银花； 李春奇；
【机构】 河南农业大学生命科学学院； 中国农业科学院郑州果树研究所；
【摘要】 为获得高纯度高质量的DNA和建立稳定的SSR-PCR反应体系,采用常规CTAB法和改进CTAB法提取半矮生桃基因组DNA。结果表明:改进CTAB法提取的DNA纯度高,多糖和蛋白质含量低,可用于SSR反应。同时,通过对影响SSR反应的6个要素设计正交试验,确定了最优的SSR-PCR反应体系,20μl反应体系为:5mmol/LMg2+1.5μl,2.5mM/L dNTPs2μl,5U的Taq酶0.22μl,10×Buffer缓冲液4μl,10mM引物0.6μl,20ng模板0.8μl,优化的退火温度为57.6℃。
- 【会议录名称】 中国园艺学会桃分会第二届学术年会论文集
- 【会议名称】中国园艺学会桃分会第二届学术年会
- 【会议时间】2009-06-01
- 【会议地点】中国四川成都
- 【分类号】S662.1
- 【主办单位】中国园艺学会桃分会、四川省农业科学院园艺研究所