刀豆蛋白A诱导的肝损伤模型发病机制及补肾健脾方干预作用研究

【作者】 刘光伟； 叶军； 高月求； 陈建杰； 王灵台；

【机构】 上海中医药大学附属普陀医院感染科； 上海中医药大学附属曙光医院肝科；

【摘要】 目的:1.建立刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A)诱导的慢性肝损伤模型,探讨T细胞亚群和细胞凋亡机制在此模型中的作用;2.探讨补肾健脾方对此模型保护作用的免疫学机制及其治疗慢性肝病的理论依据。方法:雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、补肾健脾组。按ConA5mg/kg给药量尾静脉注射每周3次,共2w。治疗组在造模成功后给予补肾健脾干预,治疗3w研究结束。结果:1.按ConA5mg/kg给药量每周3次尾静脉注射造模2w,模型组小鼠血清ALT及AST明显升高,肝脏病理显示慢性肝损伤表现;3.模型组TNF-α、IL-18、IL-10含量明显升高(P<0.05),IFN-γ(P<0.05)含量下降,TNF-α、IL-18mRNA表达增强,fas抗原表达增强,肝内CD4+T细胞活化比例明显增加,CD8+T细胞活化比例下降;4.补肾健脾方组肝内CD4+T淋巴细胞活化受到明显抑制,CD8+T淋巴细胞活性增强,TNF-α、IL-18mRNA表达及含量下降,IFN-γ含量升高,免疫组化Fas抗原的表达减弱。结论:1.按ConA5mg/kg给药量造模3周,可明显诱导慢性肝损伤,致死率低,模型稳定可靠。2.ConA诱导肝损伤模型的可能通过诱导TNF-α及IL-18的mRNA表达,从而上调IL-10的含量,降低IFN-γ的含量,并通过活化CD4+T淋巴细胞,诱导肝细胞fas抗原的表达,促进肝损伤慢性化进程。3.补肾健脾方通过降低TNF-α及IL-18mRNA的表达,促使细胞因子网络紊乱状态的复常,抑制CD4+T细胞的含量及其活性,活化CD8+T细胞,抑制肝细胞fas抗原的表达,阻断细胞凋亡的发生。更多还原