健脾活血方药物血清对LPS诱导RAW264．7细胞分泌TNF-α和内毒素受体基因表达的影响

【作者】 彭景华； 胡义扬； 成扬； 冯琴； 许莉丽； 陈少东； 陶庆； 李风华；

【机构】 上海中医药大学附属曙光医院、上海中医药大学肝病研究所；

【摘要】 目的:观察健脾活血方药物血清对内毒素诱导巨噬细胞株RAW264.7分泌炎症因子及内毒素受体基因表达的影响,以进一步阐述该方抗酒精性肝损伤作用的机理。方法:采用巨噬细胞株RAW264.7,在毒性试验确立药物血清无毒性作用浓度后,分正常组、模型组和药物血清组。正常组与模型组分别以5%、10%正常大鼠血清培养,药物血清组分别以5%、10%健脾活血方药物血清培养。药物作用1h后,添加LPS(终浓度0.1ug/ml)作用1h或2h。ELISA法检测培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Western Blot法观察细胞TNF-α蛋白表达,荧光定量PER法检测细胞TNF-α、TLR2、TLR4、CD14基因表达。结果:LPS刺激2h后,模型组RAW细胞培养上清TNF-α含量显著升高,TNF-α蛋白表达显著增强,LPS刺激1h后,模型组RAW细胞TNF-α、TLR4、CD14 mRNA表达显著增强,药物血清组的上述变化显著减轻。结论:健脾活血方药物血清对LPS诱导巨噬细胞株RAW264.7活化分泌炎症因子具有直接抑制作用,该作用与其抑制内毒素受体TLR4、CDl4 mRNA的表达有关。更多还原