雷公藤对小鼠星形胶质细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用

【作者】 郭敏芳； 樊红翠； 肖保国； 尉杰忠； 孙永胜； 纪宁； 粱丽云； 马存根；

【机构】 山西大同大学医学院脑科研究所； 复旦大学附属华山医院神经病学研究所；

【摘要】 目的观察雷公藤对小鼠星形胶质细胞缺氧缺糖再给氧损伤的保护作用。方法体外培养新生小鼠星形胶质细胞,先将细胞培养液更换为无糖DMEM,再用85%N₂、5%CO₂与10%H₂混合气体造成细胞缺氧缺糖3 h,再给予完全培养基及95%O₂与5%CO₂混和气复氧6h,建立缺氧/复氧损伤的星形胶质细胞凋亡模型,模拟缺血再灌注损伤。药物组于缺氧/复氧时分别加人200ng/ml、500ng/ml、1μg/ml雷公藤进行干预。使用Hoechst 33342荧光染色分析细胞凋亡百分率,ELISA观察炎性因子的变化,RT-PCR观察细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果星形胶质细胞缺氧/复氧后,细胞凋亡率明显升高,平均凋亡率为（35.3±5.8）%,复氧前加入200ng/ml、500ng/ml、1μg/ml雷公藤分别使细胞平均凋亡率降为:（17.7±2.3）%、（20.4±3.2）%、（21.8±2.6）%（P<0.05）;星形胶质细胞损伤后炎性因子IL-2、TNF-α和MCP-1的释放明显升高（0.43±0.08、0.73±0.15、0.59±0.1）,雷公藤各浓度均能显著降低炎性因子的释放,200ng/ml（0.23±0.05、0.38±0.07、0.32±0.08）、500ng/ml（0.27±0.02、0.41±0.08、0.29±0.05）、1μg/ ml（0.26±0.08、0.46±0.14、0.33±0.09）,与正常组（0.38±0.12、0.48±0.11、0.39±0.04）之间没有明显差异;缺氧/复氧组抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax的表达均明显增加,而雷公藤各浓度均可以减少Bax基因的表达,提高Bcl-2/Bax值,与缺氧/复氧组比较具有显著差异（P<0.05）。结论雷公藤对体外培养的星形胶质细胞缺氧/复氧性损伤具有显著的保护作用。更多还原