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用重组基因表达产物筛选抗IBDV vp2蛋白特异性单克隆抗体
【机构】 扬州大学 江苏省动物预防医学重点实验室；
【摘要】 为了快速获得特异性单克隆抗体并应用于抗原表位分析等研究工作,本研究用传染性法氏囊病病毒江苏株(IBDV-JS)免疫Balb/c小鼠,以重组杆状病毒表达的IBDV-VP2蛋白为抗原筛选IBDV-VP2特异性单抗,结果获得3株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为185、2H11和5D1。特异性试验表明,三株单抗均能通过间接免疫荧光(IFA)的方法与感染IBDV的CEF反应,而不与感染新城疫病毒、禽腺病毒、禽痘病毒、禽白血病病毒、马立克氏病病毒和网状内皮组织增殖病病毒的CEF反应。在Western-blot中,单抗能识别重组杆状病毒rVP2中表达的一条分子量为40kD大小的VP2特异性蛋白条带。在IFA分析中部分单克隆抗体不仅能与IBDV病毒感染的CEF反应,而且还能与pcDNA- VP2暂态表达蛋白反应;IFA和ELISA效价测定表明,单抗细胞培养上清效价均达1:160,腹水效价分别达1:64000和1:80000。亚类鉴定表明,1B5为IgG2b,2H11和5D1为IgG1。这些单抗对于进一步深入研究IBDV变异分子机制以及VP2蛋白抗原表位构象提供了很好的生物材料。
【基金】 国家863高技术项目(863-2006AA10A205);高等学校全国优秀博士论文作者专项资金项目(200256);江苏省高校自然科学重大基础研究项目(07KJA23021)资助
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会
- 【会议时间】2008-09
- 【会议地点】中国江苏扬州
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会禽病学分会（Poultry health Branch,Chinese Association of Animal and Veterinary Science）