新型聚阳离子基因载体模型的构建

【作者】 顾子旭； 袁媛； 何金林； 张明祖； 倪沛红；

【机构】 江苏省有机合成重点实验室苏州大学材料与化学化工学部；

【摘要】 <正>通过氧阴离子聚合方法,制备胆固醇封端的聚阳离子Chol-PDMAEMA30[甲基丙烯酸-2-（二甲氨基）乙酯]和部分羧基被巯基化的聚阴离子MePEG2000-b-PMAASH,通过静电相互作用,构建一种新型的非病毒基因载体。其步骤包括:（1） DNA与聚阳离子Chol-PDMAEMA30复合,形成表面带正电荷的复合物;（2）用MePEG2000-b-PMAASH通过静电作用包裹Chol-PDMAEMA30/DNA复合物,屏蔽表面正电荷;（3）为了提高载体的稳定性,向上述复合物中加入H₂O₂,使MePEG2000-b-PMAASH中的巯基被氧化,形成二硫键用于固定壳层。通过Zeta电位、DLS和透射电镜等方法,测试复合载体的粒径、表面电荷、粒子形态等性质。利用临界胶束浓度测试、凝胶电泳实验和溴乙啶取代实验,研究了聚阳离子Chol-PDMAEMA30与DNA的结合能力、复合物的稳定性以及协同链交换反应等。结果表明,当MePEG2000-b-PMAASH中[MAA]与Chol-PDMAEMA30中[DMAEMA]的摩尔比为l:1时较为合适。进一步研究载体在模拟细胞外与细胞内环境下的分解性能,发现这类复合基因载体在模拟血液传输过程中是稳定的,但是当进入到模拟细胞内环境时,由于细胞内的还原作用,二硫键断裂,载体的结构被破坏,DNA被释放。更多还原