人脐带血造血干/祖细胞的遗传毒性研究

【作者】 张立将； 卢觅佳； 由振强； 杨红忠； 周国亮； 宋翼升； 陈浩； 宣尧仙；

【机构】 浙江省医学科学院安全性评价研究中心；

【摘要】 目的了解人脐带血造血干/祖细胞(HS/PCs)的遗传毒性影响。方法取55只BALB/c雄性裸鼠随机分为5组进行骨髓细胞微核试验(30只)和精子畸形试验(25只)。两试验裸鼠均经尾静脉注射给予人脐带血造血干/祖细胞1.25×109cell/kg(高剂量)、3.75×10~8cell/kg(中剂量)、1.25×10~8cell/kg(低剂量)和阴性对照(含1%人血清白蛋白的0.9%NaCl注射液)以及腹腔注射给予阳性对照环磷酰胺(CP,50 mg/kg)。微核试验连续给药2天,末次给药后24小时,处死裸鼠,取股骨,挤出骨髓液,与胎牛血清混匀、推片,甲醇固定,1:9 Giemsa染液染色,油镜下观察。每只裸鼠计数2000个嗜多染红细胞(PCE)中出现的微核细胞数,计算各组的微核率。精子畸形试验连续给药5天,首次给药后第35天,处死裸鼠,取两侧附睾,在盛有1 ml生理盐水的平皿中,将附睾纵向剪1～2刀,静置5分钟,四层擦镜纸过滤,吸滤液涂片,甲醇固定,5%伊红染色,高倍镜下观察。每只裸鼠检查完整无重叠的精子300条,计数不同类型的畸形精子数,计算精子畸形率(%)及畸形精子类型构成比。使用SPSS 16.0统计软件建立数据库,采用χ~2检验对各剂量组及阳性对照组的微核率、精子畸形率及精子畸形类型构成比与阴性对照组进行统计分析。结果HS/PCs各剂量组微核率与阴性对照组均无显著性差异(P>0.05),阳性对照组(CP)的微核率显著高于阴性对照组(P<0.01)。HS/PCs各剂量组精子畸形率与阴性对照组均无显著性差异(P>0.05),阳性对照组(CP)的精子畸形率显著高于阴性对照组(P<0.01),各组畸形类型构成比无显著性差异(P>0.05),畸形精子以无定形为主,其次为无钩、双倍体(双头、双尾、双体)、胖头等。结论人脐带血造血干/祖细胞对裸鼠骨髓微核和精子畸形无诱变作用。更多还原