眼镜蛇蛇毒中L-氨基酸氧化酶对血小板的激活和结合作用研究

【作者】 李瑞； 朱绍文； 吴健波； 王婉瑜； 吕秋敏； Kenneth J.CLEMETSON；

【机构】 中国科学院昆明动物研究所； Theodor Kocher Institute,University of Berne；

【摘要】 从云南产眼镜蛇中分离纯化得到一个L-氨基酸氧化酶,命名为NA-LAAO。测定了NA-LAAO的N末端序列、酶活性、对血小板的激活及其与血小板膜蛋白的结合。结果表明:NA-LAAO的N-末端序列和其它蛇毒来源的氨基酸氧化酶有很高的同源性。NA-LAAO直接诱导洗涤血小板的聚集,但不作用于富集血小板。过氧化氢对血小板没有激活作用,但它可以提高低浓度的NA-LAAO对血小板的激活作用。NA-LAAO激活血小板时,诱导许多血小板蛋白的酪氨酸磷酸化,包括Src,Syk and PLCy2。与convulxin不同,NA-LAAO并不激活Fcγ和LAT。说明NA-LAAO对血小板的激活机制并不是通过GPVI途径。NA-LAAO诱导的血小板的聚集和血小板蛋白磷酸化受过氧化氢酶的抑制。用流式细胞仪检测发现NA-LAAO可结合于固定的血小板,同时也可结合于血小板裂解液。此外,用NA-LAAO-Sepharose 4B亲和柱可从血小板中分离到几个血小板膜蛋白。这些结果说明,NA-LAAO与血小板膜蛋白的结合在血小板激活中可能起到一定作用。更多还原