人绒毛膜促性腺激素对乳腺癌侵袭转移作用的研究

【作者】 林授； 林德馨；

【机构】 福建医科大学生物化学与分子生物学系；

【摘要】 人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)的主要生理功能是刺激卵巢黄体分泌孕酮,维持妊娠,促进乳腺发育。流行病学调查发现,生育后的妇女乳腺癌发生率降低。形态学和基因芯片的初步研究结果提示,妊娠期分泌高浓度hCG对乳腺细胞的直接作用可能与生育后妇女乳腺癌发生率降低相关。因此本研究试图通过构建mLHR—pCDNA3.1(+)表达载体,转染MCF-7细胞,探讨hCG对乳腺癌细胞的作用,并分析hCG对相关基因表达的影响及其作用机制。用Kpn I/Hpa I双酶切LHR-cDNA质粒载体;Kpn I/EooR V双酶切pcDNA3.1(+)载体,构建黄体生成素受体(Luteinizing Hormone/human Chorionio Gonadotropin receptor,LHR)真核表达质粒载体(pcDNA3.1(+)-LHR),通过酶切图谱分析及DNA序列测序等方法鉴定。用Lipofectamine2000脂质体介导pcDNA3.1(+)-LHR稳定转染MCF-7乳腺癌细胞,G418筛选,通过RT-PCR和细胞内cAMP浓度测定方法,证实转染LHR的MCF-7细胞高表达LHR。通过MTT法测定hCG对乳腺癌细胞增殖力影响,转染LHR的MCF-7细胞增殖力无明显改变(P>0.05)。应用体外侵袭转移实验方法,测定hCG对乳腺癌细胞侵袭力影响,转染LHR的MCF-7细胞侵袭力明显降低(P<0.05)。在此基础上,以半定量RT-PCR方法,测定hCG对乳腺癌细胞MMP1、MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP3、VEGF等侵袭转移相关基因转录表达的影响,结果发现转染LHR的MCF-7细胞MMP9、VEGF基因转录受抑制(P<0.05),而TIMP1转录水平升高(P<0.05)。结果表明,hCG与LHR结合,可抑制MCF-7乳腺癌细胞侵袭力,该作用可能与影响细胞MMP9、VEGF、TIMP1基因转录有关。更多还原