鲤春病毒单克隆抗体的研制及其初步应用

【作者】 邴国霞； 张鹤晓； 张利峰； 吴清民； 刘金华； 段向英； 江育林；

【机构】 中国农业大学动物医学院； 北京出入境检验检疫局； 深圳出入境检验检疫局；

【摘要】 通过鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)繁殖鲤春病毒(SVCV),经差速离心法和蔗糖密度梯度离心法提纯该病毒,免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA法筛选和有限稀释法3次克隆,获得了1株能稳定分泌SVCV单克隆抗体的杂交瘤细胞株2E9。经鉴定,该株单克隆抗体的亚类为IgG2b,腹水ELISA效价达到1:106以上。以2E9单抗腹水为材料,采用间接免疫荧光抗体技术对SVCV欧洲株和亚洲株感染的鲤鱼上皮瘤细胞进行检测,结果表明,该抗体可特异性检出接毒后感染细胞中的SVCV欧洲株和亚洲株。将杂交瘤细胞冻存3和6个月,复苏后仍能稳定分泌单克隆抗体。更多还原