马铃薯体细胞融合和杂交研究

【作者】 戴朝曦； 孙顺娣； 曲秀兰；

【机构】 甘肃农业大学农业生物工程研究所；

【摘要】 用来自一个由花药培养诱导产生的普通栽培种（Solanum tuberosum）双单倍体品系“81-15”,一个南美二倍体栽培种 S．phureja 和一个野生二倍体种 S．chacoense 实生苗子叶及下胚轴原生质体进行了化学融合(PEG 加高 Ca⁺⁺)及电融合实验。三种不同加聚乙二醇（PEG6000）方法的实验结果表明,向原生质体悬浮液滴中缓慢地加 PEG 溶液,边加边轻微摇动的方法,效果较其他方法好。用国产的 DR-1型只有尖波脉冲输出的多功能细胞电融合仪,配合一个在玻片上镀金的平行多电极（电极间距0．2mm）,用频率为1．1MH_z,场强为148V_pp/cm 的交变电场处理原生质体悬浮液20～30s,可形成2～4个细胞的串,紧接着施加 1．4KV/cm,630μs 的直流高压脉冲1～2次,可得到40%～60%的细胞融合率。电融合对原生质体的伤害比化学融合小而且操作简便,融合效果较好。用分化培养基筛选的方法结合田间形态观察、染色体检查和过氧化物同功酶谱分析,从 S．tuberosum+S．phureja 和+S．chacoense 的420株分化苗中选出了109个体细胞种间杂种株系,田间农艺性状观察及分子生物学鉴定等工作正在进行中。更多还原