左旋咪唑对EAE大鼠脊髓炎症相关细胞因子表达的影响

【作者】 郑荣远； 吴赛珍； 邱伟文； 卢晔芬；

【机构】 温州医学院附属第一医院神经科；

【摘要】 目的:观察 LMS 不同阶段给药对 Wistar 大鼠 EAE 发病的影响及对其脊髓炎症相关细胞因子表达的影响,探讨 LMS 促发加重 EAE 的可能机制。方法:用 GPSCH 免疫 Wistar 大鼠制作 EAE 模型,分别在免疫前（LMS1组）、免疫同时（LMS2组）、免疫后（LMS3组）给 LMS 10mg·kg^-1。比较 LMS 不同阶段给药对 EAE 行为学及组织学的影响;用 RT-PCR 测大鼠脊髓 Th1类细胞因子 （IFN-γ和 IL-12/23 P40）、Th2类细胞因子（IL-10）和 Th3类细胞因子（TGF-β1）mRNA 的表达, 并将各细胞因子 mRNA 的表达水平与临床症状评分作相关性分析。结果:（1）行为学观察:大鼠于免疫后11天开始陆续发病,LMS2组发病率（8/9）较 EAE 组发病率（3/8）高（P<0.05）,LMS1组发病率（5/10）与 EAE 组比无显著差异,三组潜伏期无明显差异。病情严重程度相比,LMS1组和 LMS2组较 EAE 组重（P<0.05,P<0.01）。LMS3组首次发病率为2/10,其潜伏期、达峰时间、最大症状评分与 EAE 组比均无显著性差异;发病的2只大鼠在症状完全恢复后再次出现 EAE 复发,但是持续时间较短。（2）组织学变化:HE 染色见 LMS1组和 LMS2组 CNS 炎症浸润较 EAE 组重 （P<0.05）,而 LMS3组与 EAE 组无明显差异。Kluver & Barrera 髓鞘染色见发病大鼠 CNS 内有大小不等的片状髓鞘脱失,大多局限在炎症改变明显的血管套周围的白质区。（3）RT-PCR 结果:与 EAE 组比,LMS1组脊髓 IFN-γ和 IL-12/23 P40 mRNA 表达升高,TGF-β1和 IL-10 mRNA 表达下降,但仅 IL-10有统计学意义（P<0.01）;LMS2组脊髓 IFN-γ和 IL-12/23 P40 mRNA 表达升高（P<0.05, P<0.01）,TGF-β1和 IL-10 mRNA 表达下降（P<0.05,P<0.01）:LMS3组除 IL-12/23 P40 mRNA 有显著升高（P<0.01）外,其他无显著差异;CFA 对照组脊髓细胞因子表达水平都很低（P<0.01）。相关性分析结果显示,脊髓 IFN-γ和 IL-12/23 P40 mRNA 表达水平与临床症状评分呈正相关,脊髓 TGF-β1和 IL-10 mRNA 表达水平与临床症状评分呈负相关。结论:（1）左旋咪唑免疫前给药和免疫同时给药能加重 Wistar 大鼠 EAE,左旋咪唑免疫后间断给药能使 Wistar 大鼠 EAE 复发;（2）左旋咪唑可能通过促进中枢神经系统 Th1类细胞因子 IFN-γ和 IL-12/23 P40 mRNA 的表达,抑制 Th2/Th3 类细胞因子 TGF-β1和 IL-10 mRNA 的表达而促发 EAE;（3）EAE 症状越重,Th1类细胞因子表达越高,Th2/Th3类细胞因子表达越低。更多还原