大鼠精原干细胞的分离纯化

【作者】 唐立新； 范双喜； 文任乾； 江芳； 徐姗姗； 邓顺美； 马春杰； 唐运革；

【机构】 广东省计划生育科学技术研究所；

【摘要】 目的:探讨大鼠精原干细胞的分离纯化。方法:采用酶消化法制备8d Wister 大鼠睾丸单细胞悬液;Percoll 液不连续密度梯度分离精原干细胞;用贴壁速度的差异纯化精原干细胞.光镜观察精原干细胞的形态结构特征;应用碱性磷酸酶(AP)活性检测鉴定精原干细胞.结果:精原干细胞主要分布在28%～36%(Ⅱ带)间的 Percoll 梯度;分离纯化的精原干细胞形态结构与组织切片上精原干细胞一致;碱性磷酸酶检测精原干细胞呈阳性表达,在睾丸体细胞呈阴性表达。结论:利用酶消化法、Percoll 液不连续密度梯度及细胞贴壁速度的差异,分离纯化的精原细胞满足体外实验要求;AP 活性表达可作为检测培养体系中大鼠精原细胞的一个辅助指标。更多还原