5-氟尿嘧啶对瘢痕成纤维细胞胶原合成的影响

【作者】 龚轶一； 李小静； 王明丽；

【机构】 安徽医科大学附属医院整形外科； 安徽医科大学微生物教研室；

【摘要】 目的:探讨5-氟尿嘧啶对体外培养病理性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法: ①原代培养成纤维细胞:手术取4例增生性瘢痕（Hypertrophic scar,HS）、4例瘢痕疙瘩（Keloid,K）、 4例正常皮肤组织（Normal skin,NS）,按文献方法进行成纤维细胞原代培养,待细胞融合后传代。②取4～6代传代细胞接种于96孔板,利用四唑盐（MTT）比色法测定25mg/ml 浓度5-氟尿嘧啶干预10min,继续培养24H 后三种成纤维细胞的活力,PBS 组作对照。③利用³H-脯氨酸掺入法检测经5-氟尿嘧啶干预后成纤维细胞的胶原蛋白分泌能力变化.④利用 RT-PCR 法比较三组成纤维细胞干预和对照组Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白 mRNA 前后的变化.结果:经5-氟尿嘧啶干预后成纤维细胞形态未发生明显变化,三组不同来源成纤维细胞未干预时增殖能力 KF>NSF（t=3.542,p<0.01）,HSF>NSF （t=3.257,p<0.01）;5-氟尿嘧啶干预成纤维细胞10分钟,24H 后三组细胞增值能力下降(t_ns=2.561, t_kf=2.847t_hsf=2.641,P<0.05),胶原蛋白分泌能力明显下降(t_ns=2.958,t_kf=2.454,t_hsf=2.251, P<0.05).RT-PCR 电泳结果经图像分析Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白 mRNA 干预前后目的基因与内参比值无统计学差异（p>0.05）结论:25mg/ml 5-氟尿嘧啶对成纤维细胞体外干预10min 可有效抑制病理性瘢痕及正常皮肤来源的成纤维细胞体外增殖和胶原合成,但Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白的转录水平未受影响.更多还原