巨噬细胞金属弹力酶基因转染CT-26细胞对小鼠原位结肠癌生长及微血管生成的影响

【作者】 石海； 许建明； 胡乃中； 梅俏； 鲍峻峻；

【机构】 安徽医科大学第一附属医院消化内科；

【摘要】 <正>目的巨噬细胞金属弹力酶是基质金属蛋白酶(matrix metaUoproteinase,MMP)家族成员之一。与其他 MMP 成员不同,MME 在肿瘤血管生成中具有重要作用。本研究主要探讨小鼠巨噬细胞金属弹力酶 (mouse macrophage metalloelastase,MME)对小鼠原位结肠癌生长、微血管生成及血管内皮生长因子(vas- cular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法扩增编码 MME 基因结构域Ⅰ和Ⅱ的 cDNA 片段,构建真核细胞的表达载体 pcDNA 3．1-MME 并稳定转染小鼠 CT-26结肠癌细胞。采用 RT-PCR 和 Western blot 方法,鉴定 MME mRNA 和重组蛋白在 CT-26细胞中的表达。采用明胶酶谱方法,鉴定 MME 重组蛋白的酶活性。建立 MME 转染组及对照组小鼠原位结肠癌种植模型,观察 MME 对原发性结肠癌生更多还原