慢性乙型肝炎病毒感染与p16^INK4A基因启动子甲基化状态的研究

【作者】 朱荣； 李百周； 凌玉琴； 张慧萍； 李华； 刘晔； 胡锡琪； 朱虹光；

【机构】 复旦大学上海医学院病理学系； 复旦大学附属肿瘤医院病理科；

【摘要】 目的通过研究慢性乙型肝炎病毒 （HBV）感染性疾病中,HBV 相关组织病理学指标及 x 基因的变异与 p16^INK4A基因启动子甲基化状态之间的关系,明确病毒对 p16^INK4A甲基化的影响和其在 HBV 相关肝细胞癌形成中的作用。方法选取23例 HBV 相关肝细胞癌和25例慢性乙型肝炎肝穿刺活检病例作为研究对象,癌与癌旁组织以及肝穿组织中 p16^INK4A基因启动子的甲基化状态采用甲基化特异性 PCR（MSP）进行检测。免疫组化 En Vision 二步法显示肝组织内 HBsAg、 HBcAg、HBeAg 和 HBx 蛋白的表达；荧光实时定量 PCR 检测单位肝组织 HBV DNA 含量。HBV x 基因的变异用 PCR 扩增和直接序列测定来检测。结果在癌旁组织（P=0．025）和慢性乙型肝炎（P=0．029）病例中,存在 p16^INK4A甲基化的病例其肝组织内 HBx 蛋白的表达明显高于非甲基化病例。但在肝癌组织中,HBx 蛋白的表达与 p16^INK4A甲基化无关。在所有肝组织中, HBsAg、HBcAg、组织 HBV DNA 含量和 x 基因突变均与 p16^INK4A甲基化状态无关。结论在癌前病变中,p16^INK4A甲基化与 HBx 蛋白高表达显著相关。提示 HBx 蛋白可能诱导 p16^INK4A甲基化而使该抑癌基因失活,在 HBV 相关肝细胞癌形成中起了重要作用。更多还原