胎儿附属物来源细胞的分离、培养和冻存

【作者】 余旭明； 薛志刚； 戴国胜； 徐旭； 陈万安； 范锟铻； 梁德生； 夏家辉；

【机构】 深圳市第二人民医院烧伤科； 中南大学国家重点实验室；

【摘要】 目的研究从足月产胎儿脐带和胎盘中分离培养细胞的方法,并研究其冻存效果及影响因素,为组织工程、细胞治疗和基因治疗提供种子细胞。方法应用酶消化方法从脐带从分离出脐静脉内皮细胞、脐带血管周细胞,从胎盘和胎膜中分离出贴壁细胞,进行培养。对胎盘、脐带进行冻存,研究 DMSO 浓度对其冻存效果的影响;同时研究组织和细胞冻存前后免疫表型的改变。结果成功地分离出脐静脉内皮细胞、脐带血管周细胞、胎盘组织贴壁细胞、胎膜组织贴壁细胞;研究结果显示,10%DMSO 浓度冻存效果最佳,与5%、15%和20%DMSO 浓度相比,具有明显差异(P<0.5); 组织和细胞冻存后免疫表型并没有改变。结论可以从脐带、胎盘和胎膜中分离出细胞,可采用10 %DMSO 浓度冻存液冻存胎儿附属物及其分离的细胞结论:可以从脐带、胎盘和胎膜中分离出有价值的细胞,10%DMSO 浓度冻存效果最好,冻存后组织和细胞免疫表型未发生改变。更多还原