普洱茶提取物自由基的清楚能力及对HPF-1细胞氧化损伤的保护作用

【作者】 揭国良； 林智； 张龙泽； 吕海鹏； 何普明； 赵保路；

【机构】 浙江大学茶叶研究所； 中国农业科学院茶叶研究所； 中国科学院生物物理研究所脑与认知国家重点实验室；

【摘要】 <正>目的:探讨普洱茶的抗氧化生物活性及生物活性成分。方法:用丙酮,蒸馏水,氯仿,正丁醇,分步萃取普洱茶,乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物使用柱分离方法进行再次分离,乙酸乙酯萃取物得到八个不同的组分,正丁醇萃取物得到五个不同的组分。自由基的清除试验,采用芬顿反应产生羟自由基,邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子,使用化学发光法检测普洱茶各分离物对自由基的清除作用。对细胞氧化损伤的保护试验,采用正常二倍体男性胚肺细胞,用双氧水进行损伤,加入普洱茶的各分离组分进行保护。通过加入3-(4,5)-2-唑噻-(2,5)-二苯基溴化四氮唑蓝,检测细胞线粒体的活力,反映普洱茶各分离组分对细胞的保护作用。通过检测细胞内活性氧试验,探讨普洱茶各组分对细胞氧化损伤的保护作用机理。结果:普洱茶乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物及柱分离的组分,对羟自由基,超氧阴离子,具有很好的清除作用。乙酸乙酯萃取物的第二、第八组分,正丁醇萃取物的第二、第四和第五组分,对双氧水引起的细胞损伤,具有很好的保护作用,在正常培养条件下,还能够增加细胞活力,各分离组分,可以通过减少被损伤细胞内的活性氧的积累,保护被损伤的细胞。另外发现,普洱茶乙酸乙酯萃取物的第八组分,在上述试验中,具有比没食子儿茶素没食子酸酯更强的活性作用,但通过高效液相色谱分析,其组分中,几乎不含茶叶中典型的单体多酚,茶黄素和没食子酸。讨论:通过以上试验可以认为,普洱茶具有很好的抗氧化能力。普洱茶经过长时间的后发酵和储藏过程,化学成分发生很大的改变。其中的一些氧化产物,具有很好的抗氧化能力,其成分分离和结构鉴定,具有很重要的意义。另外,普洱茶的抗氧化能力的体内试验,需要进一步探讨。更多还原