节点文献
用Gateway技术克隆并表达汉滩病毒G1蛋白ITAM样基序
【作者】 牟丹蕾； 白雪帆； 黄长形； 王英鹏； 李光玉； 潘蕾； 李新红； 王临旭； 张岩；
【机构】 第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心；
【摘要】 目的克隆并表达汉滩病毒G1蛋白胞浆区尾段ITAM样基序及其突变体。方法采用RT-PCR方法,扩增汉滩病毒G1蛋白ITAM样基序及其中2个保守酪氨酸残基突变基序编码基因,然后应用Gateway技术将目的基因克隆至pDESTTM15表达载体,在BL21-AI 中经L-阿拉伯糖诱导表达,免疫印迹确证融合蛋白的表达。结果成功地构建了2个含汉滩病毒G1胞浆区尾段ITAM样基序编码序列表达载体pDEST-ITAM-L、pDEST-ITAM和1个含保守酪氨酸残基突变的G1 ITAM样基序编码序列表达载体pDEST-ITAM-YY-FF(Y615F, Y628F),并在大肠埃希杆菌中得到高效表达,免疫印迹证实目的蛋白与GST融合表达。结论获得了3种与GST融合的G1 ITAM样基序及其突变基序的重组蛋白,为进一步探讨汉滩病毒G1蛋白ITAM样基序在HFRS免疫信号传递中的作用奠定基础。
【关键词】 汉坦病毒；
囊膜糖蛋白类；
免疫受体酪氨酸活化基序；
- 【会议录名称】 第七次全国肾综合征出血热学术会议论文汇编
- 【会议名称】第七次全国肾综合征出血热学术会议
- 【会议时间】2006-06
- 【会议地点】中国浙江杭州
- 【分类号】Q939.4
- 【主办单位】中华医学会感染病学分会、中国疾病预防控制中心、卫生部自然疫源性疾病专家咨询委员会