人AGM区HSC的分离及在含AGM基质细胞体系的培养

【作者】 吴北燕； 黄绍良； 陈惠芹； 张绪超；

【机构】 广州中山大学附属第二医院干细胞中心；

【摘要】 <正>目的:分离人AGM区HSC,观察AGM-HSC体外培养体系中人AGM基质细胞对HSC的作用。方法:解剖显微镜观察人AGM区组织形态,并以HE染色观察人胎龄30-45天胚胎AGM区组织结构,免疫组化方法检测AGM区细胞CD34、Flk-1、VEGF表达。分离AGM来源细胞,通过直接接种和经Transwell 非直接接触两种方法接种含人AGM基质细胞(hAGMS3和hAGMS4)饲养层的培养体系,培养条件为含FIt-3L(50ng／ml)、SCF(50ng／ml)、LIF(10ng／ml)、VEGF(10ng／ml)、BMP4(25ng／ml)的造血更多还原