HSV-VP22介导的蛋白转导增强了Microdystrophin基因的感染效率

【作者】 熊符； 张成； 肖少波； 周文良； 李仪婉市； 李美山； 王淑辉； 于美娟； 尚延昌； 彭福宁；

【机构】 中山大学附属第一医院神经内科； 华中农业大学农业微生物国家重点实验室； 中山大学生命科学院生理教研室； 中山大学干细胞与组织工程研究中心；

【摘要】 目的:研究蛋白转导在DMD疾病治疗中的可行性,以期提高Microdystrophin基因的表达效率,达到更有效地治疗DMD模型鼠mdx鼠肌病的目的,为人DMD疾病的治疗研究奠定基础。方法:构建重组质粒pAVXI-VP22- Microdystrophin(与HSV VP22 C-末端融合)及pAVXI-VP22,pAVXI-Microdystrophin,体外转染3T3细胞,通过Real-time PCR及细胞免疫组化检测Microdystrophin基因的表达,比较不同组间Microdystrophin基因的表达效率。分别通过肌肉和腹腔注射三种重组质粒到mdx鼠体内,检测Microdystrophin基因的在体内的表达分布情况,以及肌肉的肌电图和TA的收缩力,比较不同组之间的差异。结果:体外实验结果显示HSV VP22介导的Microdystrophin基因比单独Microdystrophin基因在3T3细胞中增强了约3倍的表达。体内研究结果同样显示VP22增强了Microdystrophin基因在肌肉中的表达,而且更好地改善了病变肌肉的功能和扩大了Microdystrophin基因在体内的分布。结论:HSV VP22介导的细胞间蛋白传递增强了 Microdystrophin基因在体外和体内的感染效率,提示蛋白转导在DMD及其他疾病的基因治疗中可能是一个潜在有用的载体工具。更多还原