中药土鳖虫基于SELDI-TOF技术的蛋白质组分析

【作者】 李春梅； 王若光； 尤昭玲； 刘小丽； 刘惠萍； 熊德慧； 胡维新；

【机构】 湖南中医药大学中西医结合系； 中南大学生物科学与技术学院；

【摘要】 目的对传统中药土鳖虫蛋白肽成分进行蛋白质组初步分析,建立阿胶蛋白质质量指纹图。方法采用饱和硫酸胺沉淀,透析脱盐冻干法获得阿胶水溶性蛋白肽,采用 Ciphergen Biosystems Inc．Protein Chip or Biol- ogy System(美国 PBSⅡ+)及配套的 NP10芯片、激光解析离子化-飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS),分析土鳖虫 Mr 1500～13000区间蛋白质、肽分布及其相对分子质量。结果土鳖虫水溶性蛋白质/肽分子量共显示计20 个肽分子量峰,根据对比氨基酸分子量分析,土鳖虫水溶性肽成分数量较少,4000Da 以下无峰出现。土鳖虫盐析过程中,沉淀蛋白上浮部分(G2-2)和下沉部分(G1-1),4500～5000Da 检测到4个分子量峰,5200～5 400Da 检测到5个分子量峰,8000～8600Da 检测到4个分子量峰,11000～12000Da 检测到7个相对分子量峰。结论通过分析,可以形成土鳖虫水溶性蛋白质/肽成分质量指纹图(PMF),可作为土鳖虫数字化质控标准；并为进一步分离、纯化及验证土鳖虫功能相关活性蛋白质/肽成分打下基础,并对中药资源的可持续利用有积极意义。更多还原