O型口蹄疫病毒基因重组腺病毒动物免疫试验

【作者】 卢曾军； 曹轶梅； 刘在新； 谢庆阁；

【机构】 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室；

【摘要】 构建了两株O型口蹄疫病毒(FMDV)基因重组腺病毒,分别带有O/China／99 P1-2A-3C(adv-p12x3c)和P1- 2A-3CD(adv-p12x3cd)基因。用这两株重组腺病毒分别免疫豚鼠,结果adv-p12x3c重组腺病毒可以刺激豚鼠产生保护性的免疫反应,1×108-2×108pfu的重组腺病毒肌肉注射免疫豚鼠,可以保护豚鼠抵抗10 000豚鼠半数感染量(GID50)的同型口蹄疫强毒的攻击,保护率分别达到5／6(83．3％)和6/6(100％)。而相同免疫剂量的adv-p12x3cd重组腺病毒免疫组仅产生了部分的免疫保护,保护率仅为1/6。Ad5野生型腺病毒和PBS注射对照组均未产生任何的免疫保护效果。用5×108pfu 的adv-p12x3c重组腺病毒肌肉注射免疫猪,并以健康非免疫猪作为对照组。用液相阻断ELISA方法检测FMDV特异性抗体变化,用MTT法检测淋巴细胞的增殖情况。在免疫后第28天,经肌肉接种攻击100个猪半数感染量(PID50)的FMDV猪体适应毒。经过11d的临床观察,结果,非免疫对照组猪于攻毒后24h即开始发病,至72h后对照组所有猪均出现典型的口蹄疫临床症状。而重组腺病毒免疫猪在攻毒后第7天仍表现正常,至第8天时其中的一头猪出现轻微的临床症状,其余的 3头猪至第11天试验结束时仍表现正常,达到3／4保护。重组腺病毒免疫猪后可出现特异性的体液和细胞免疫应答。更多还原