禽传染性支气管炎病毒S1、M、N三基因混合DNA疫苗研究

【作者】 周生； 王红宁； 唐梦君； 黄勇； 柳萍； 胡慧琼； 李晓英； 白天； 潘盛；

【机构】 四川农业大学动科院动物预防医学生物工程实验室；

【摘要】 构建IBV分离株S1、M、N基因的真核表达质粒pIBVS1、pIBVM、pIBVN,制备IBV质粒DNA疫苗、脂质体／DNA疫苗、壳聚糖／DNA疫苗和脂质体-pcDNAIL-2／DNA疫苗等,分别以肌肉注射(i．m)和滴鼻、点眼(i．n)两种途径免疫非免疫健康雏鸡,对免疫鸡外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数的动态变化和特异性血清抗体水平进行检测。利用PCR方法对脂质体／DNA疫苗在鸡体内的分布、基因组的整合进行检测研究。结果表明,IBV裸质粒DNA疫苗、脂质体／DNA疫苗、壳聚糖／ DNA疫苗和脂质体-pcDNAIL-2／DNA疫苗等能诱导机体产生细胞和体液免疫反应,而且它们所介导的免疫反应能显著增加宿主抵抗强毒的攻击。脂质体／DNA疫苗(i．m)、脂质体-pcDNAIL-2／DNA疫苗组攻毒保护率为100％,其他试验组为 88％-96％。DNA疫苗能在接种后迅速分布于血液及所有检测的组织器官,未检测到DNA疫苗与鸡细胞染色体发生整合的现象,疫苗具有良好的安全性。更多还原