基因Ⅶ型鹅副粘病毒NA-1株全基因组克隆及演化特点

【作者】 徐明； 毕玉海； 李志杰； 常爽； 黄海楠； 宋子运； 尹仁福； 杜眉； 丁壮；

【机构】 吉林大学畜牧兽医学院；

【摘要】 将本实验室分离保存的NA-1株鹅副粘病毒经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA．参考GenBank已收录的鹅副粘病毒ZJ1株基因组序列,设计了8对特异性引物,RT-PCR 法分别特异性的扩增出病毒各基因片段,并将各目的基因片段回收纯化,克隆PGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5a,小提质粒选取阳性克隆酶切鉴定,进行序列测定分析．将鹅副粘病毒NA-1株核苷酸序列进行同源性比较．结果表明,鹅副粘病毒NA．1株与各地代表株核苷酸同源性81．2％-91.3％．同时根据各毒株F 基因开放阅读框前389个核苷酸序列绘制出系统发育进化树,表明鹅副粘病毒NA-1株与SF02和QY97病毒株同属于基因VII型,不同于基因IX型的国家标准株F48E9和基因II型的Lasota传统弱毒株．更多还原