喜树碱类衍生物CPT21对人胃癌细胞株SGC7901的抑制作用研究

【作者】 张博； 朱琼花； 柳浦青； 何俏军； 杨波；

【机构】 浙江大学药学院；

【摘要】 目的:胃癌是世界上死亡率位居第二的癌症,具有十分普遍的生理学和病理学特点, 诸多环境因素,如螺旋杆菌感染,盐分过量吸收和蔬菜水果吸收不足,都与胃癌的发生密切相关。目前,寻找胃癌发生时的分子水平的改变以及寻找新的药物治疗靶点越来越受到人们的关注。本实验中,我们研究了 CPT21对人胃癌 SGC7901细胞的体内外抗肿瘤活性,并对其作用机制进行深入研究。方法:采用 MTT 法测定 CPT21对肿瘤细胞株的体外抑制作用;通过荷 SGC7901移植瘤裸鼠模型评价 CPT21的体内抗肿瘤活性;利用拓扑异构酶Ⅰ催化活性检测模型检测 CPT21对拓扑异构酶Ⅰ活性的体外抑制作用;流式细胞术检测 SGC7901细胞凋亡率;JC-1 染色观察线粒体膜电位（ΔΨ_m）变化:Western blot 法检测凋亡相关蛋白表达。结果:CPT21对十株肿瘤细胞株均具有显著的体外抑制增殖作用,其 IC₅₀值在0．1—12．0 μM 范围内。裸鼠移植瘤体内抗肿瘤模型的结果显示,在给药26天后,CPT21 10mg/kg 剂量组的抑瘤率达到了75．1%, 治疗效果好于相同剂量的阳性药物 Irinotecan（65．1%）。CPT21 5mg/kg 剂量组的抑瘤率也达到了42．5%。CPT21对拓扑异构酶Ⅰ活性也具有显著的抑制作用。流式细胞术结果表明,CPT21 可以诱导 SGC7901细胞的凋亡。同时,CPT21可引起 SGC7901细胞的线粒体膜电位（ΔΨ_m） 下降,并呈明显的时间、剂量依赖关系。Western blot 结果显示,CPT21促使 SGC7901细胞内 caspase-3活性的增加,PARP 的降解,procaspase-9和 XIAP 表达的下降 c-Jun NH2-terminal protein kinase（JNK）和磷酸化 JNK 表达的增加。同时,CPT21还促进 Bax 蛋白表达上调和 Bcl-2蛋白表达下调,使 Bax/Bcl-2比值明显增加。CPT21可诱导 SGC7901细胞内 p53蛋白和 p21蛋白的表达增加。结论:CPT21具有广谱的抗肿瘤活性,对胃癌 SGC7901细胞显示出了较强的体内外抗肿瘤活性。它可显著抑制 SGC7901细胞增殖并诱导其发生凋亡,CPT21的促凋亡作用可能是通过线粒体信号传导途径以及 p53通路实现的。更多还原