HL-60细胞诱导分化过程中CD44表达变化及其分子调控机制的研究

【作者】 刘佳宁； 毕高峰； 温培娥； 杨炜华； 任霞； 唐天华； 姜国胜；

【机构】 山东医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室,山东省医学科学院血液肿瘤防治研究中心；

【摘要】 目的观察诱导分化前后HL-60细胞中CD44和细胞周期调控因子p21,p27,cyclinE的基因表达变化,探讨CD44在诱导分化过程中的作用及其调控机制,筛选有效针对CD44的诱导分化剂。方法以全反式维甲酸(ATRA)、高三尖杉酯碱(HHT)、六亚甲基二乙酰胺(HMBA)建立HL-60细胞诱导分化模型,瑞氏染色观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,流式细胞术检测细胞表面CD11b抗原表达,RT-PCR法检测诱导分化前后不同时段CD44,p27,p21,CyclinE基因在mRNA水平的表达变化。结果药物处理后,HL-60细胞NBT还原率增加,流式细胞术测定CD11b抗原升高,MTT实验示细胞增殖受抑,RT-PCR显示,在mRNA水平,几种诱导分化药物均可使CD44、CyclinE基因表达下调,p21、p27基因表达增加,且随时间延长,变化明显;CD44变化与细胞周期调控因子的变化存在一定相关。结论诱导分化后,CD44基因表达下调,可能与细胞周期素cyclinE及周期素依赖激酶抑制剂p27,p21的变化相关;全反式维甲酸、高三尖杉酯碱、六亚甲基二乙酰胺可能通过下调CD44基因,进而提高p27表达,抑制cyclinE活性而发生诱导分化作用。更多还原