绿色荧光蛋白基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

【作者】 李志勇； 刘磊； 田卫东； 陈希哲； 闫征斌； 林云锋；

【机构】 四川大学华西口腔医学院口腔颁面外科；

【摘要】 <正>目的:体外研究绿色荧光蛋白(CFP)基因转染骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,并检测基因转染后细胞的生物学特性及分化潜能。方法:体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,用重组腺病毒载体Ad- GFP及脂质体介导质粒pEGFP-C1两种方法转染绿色荧光蛋白(GFP)基因,通过流式细胞术观察比较 CFP转染和表达结果;倒置显微镜下观察细胞生长情况并绘制生长曲线;将腺病毒介导的基因转染细胞经成骨定向诱导后,检测碱性磷酸酶表达和钙结节形成情况。结果:重组CFP基因的腺病毒Ad-GFP对 MSCs的感染率达41．3±1．4％,16h即有CFP表达,7d时表达趋于稳定,感染6wk时仍可见有GFP表达,更多还原