WT1肽诱导CTL杀伤白血病细胞实验研究

【作者】 顾伟英； 曹祥山； 谢晓宝； 邱国强； 吴浩清；

【机构】 江苏省常州市第一人民医院血液科；

【摘要】 <正>目的:诱导WT1肽特异性CTL产生,观察其对白血病细胞株及白血病患者骨髓细胞的杀伤活性,以及WT1基因异构体对该CTL杀伤活性的影响,探讨WT1基因体外靶向免疫治疗白血病的可行性。方法:合成一段HLA-A02限制性特异针对WT1来源9聚肽,其氨基酸序列如下: CMTWNQMNL,residues 235-243(纯度为96%),由上海博亚公司合成。选取HLA-A*0201阳性健康志愿者外周全血200 ml或外周血单采的有核细胞20ml,肝素抗凝,采用6%羟乙基淀粉-Ficoll两步法分离获得外周血单个核细胞(PBMC)。以含10%FBS的RPMI 1640调整细胞的密度为2×10 6/ml, 接种于24孔培养板中,37oC、5%CO2培养箱中孵育2h。用RPMI 1640培养液预热至37℃,洗去更多还原