ErbB2胞内区核定位信号的确定

【作者】 陈俏俏； 陈晓莹； 蒋赟赟； 刘兢；

【机构】 中国科学技术大学生命科学学院；

【摘要】 <正>ErbB2是癌基因erbB-2编码的跨膜受体糖蛋白,属于受体酪氨酸激酶(RTK)家族,在多种肿瘤特别是乳腺癌中高表达。ErbB2在膜表面过表达时,其胞外区可以脱落进入血清,ErbB2胞外区的水解能使得ErbB2胞内酪氨酸激酶活化。最近的文献报道了ErbB2在核内的定位,但是对ErbB2入核的详尽分子机制知之甚少。这里,我们用分子克隆和细胞免疫组化等方法对ErbB2的胞内区定位机制进行了研究,通过Mapping在胞内区内部找到了一段核定位序列(NLS;Nuclear Localization Signal), 该NLS对于ErbB2胞内区的入核是必需的,因为直接荧光观察和间接免疫荧光都显示删除NLS的 ErbB2胞内区因此失去核定位的现象,而仅定位于细胞质。这个核定位序列KRRQQKIRKYTMRR (aa655-668)本身足够将其与GFP的融合蛋白带入细胞核,并且该序列内包含有三个碱性氨基酸残基簇。任何一个碱性氨基酸残基簇的突变都能够极大的影响融合蛋白的核定位。以上结果证明ErbB2 可以通过核定位序列(NLS)介导的机制进入细胞核,并且提示了一个可能的机制即ErbB2胞外区水解后,其胞内区进入细胞核,从而调控相关的基因。关于ErbB2入核的详细机制还需要进行深入的研究。更多还原