甲状腺激素对体外培养大脑细胞脱碘酶mRNA表达的影响

【作者】 李岩； 李兰英； 臧晓怡； 孙云；

【机构】 天津医科大学内分泌研究所；

【摘要】 <正>目的:观察体外培养的大脑细胞Ⅱ型、Ⅲ型脱碘酶(D2、D3)mRNA在甲状腺激素的作用下其表达量的变化,为甲状腺激素与脑发育的进一步研究提供实验依据。方法:于无菌条件下取胎鼠两侧大脑半球,剥除脑膜,机械分散细胞,接种于涂有基质(PLL或鼠尾胶)的24孔培养板和25ml 培养瓶中,培养基为无血清DMEM/F12。加入改良N2配方即胰岛素(5μg/ml),转铁蛋白(100μg/ml), 亚硒酸钠(30nmol/L),谷氨酰胺(2mmol/L),培养于37℃,5%CO2,饱和湿度培养箱内,每2-3d 全量换液一次。体外培养的大脑细胞增殖培养后置于倒置显微镜下观察拍照,记录细胞形态。鉴定细胞群成分行神经元标志抗原NSE、星形胶质细胞标志抗原GFAP免疫细胞化学。培养第12天分更多还原