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微流控芯片毛细管电泳快速鉴定LC-1单链抗体DNA片段

Determination of the DNA Fragment from LC-1 ScFv with Chip-Based Electrophoresis

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【作者】 戚丽亚卢敏凌云扬殷学锋方肇伦

【Author】 QI Liya, LU Ming, LING Yunyang, YIN Xuefeng, FENG Zhaolun (Institute of Microanalytical Systems, Department of Chemistry, Institute of Biologic Macromolecule and Enzymatic Engineering, College of Life Sciene, Zhejiang University, Hangzhou 310027,China)

【机构】 浙江大学化学系微分析系统研究所浙江大学生命科学学院生物大分子与酶工程研究所

【摘要】 <正>单链抗体(ScFv)排除了单克隆抗体(McAb)中的恒定区而保留了可变区,因此它在保留较强的抗原抗体结合特异性的同时,具有较单克隆抗体更小的分子量。杂交瘤细胞株(LC-1)型ScFv可以高效作用于所有4种病理类型的肺癌细胞(肺腺癌细胞,肺鳞状癌细胞,肺大癌细胞和肺小癌细胞), 而不作用于正常细胞和组织,在肿瘤的临床治疗上,是一种较为理想的靶向治疗药物。研究通过 RT-PCR从分泌LC-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株中克隆获得重链和轻链可变区,并以SOE-PCR将之连接成ScFv。对克隆获得ScFv基因一般以1%琼脂糖凝胶电泳进行鉴定分析,但此法样品消耗量大, 测定速度慢,误差大。

【Abstract】 The chip based electrophoresis was used for the separation of (?)X-174/HaeⅢ DNA restriction fragments and for identification of the DNA fragment from LC-1 ScFv on the glass microfluidic chip with the low-viscosity sieving matrix HPMC-50. Compared with gel electrophoresis, the chip-based electrophoresis provided a rapid, sensitivity method for DNA analysis with higher resolution and less sample and regents consumption.

【基金】 浙江省科委重大项目资助
  • 【会议录名称】 第三届全国微全分析系统学术会议论文集
  • 【会议名称】第三届全国微全分析系统学术会议
  • 【会议时间】2005-10
  • 【会议地点】中国湖北武汉
  • 【分类号】O658.9
  • 【主办单位】中国化学会、国家自然科学基金委化学部
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