RNA干扰实验证明FSH诱导小鼠卵丘细胞分泌促减数分裂甾醇(MAS)参与卵母细胞减数分裂成熟

【作者】 王超； 许宝山； 金世英； 雷蕾； 付茂勇； 宋晓明； 张美佳； 周波； 洪海燕； 夏国良；

【机构】 中国农业大学生物学院；

【摘要】 <正>根据本实验室及国际相关实验研究结果,促减数分裂甾醇(MAS)可以诱导小鼠卵母细胞恢复减数分裂而成熟。但MAS的这种作用是否必须经过FSH的诱导在国际上还存在争论。本研究以FSH诱导条件下,体外培养的小鼠卵泡包裹的卵丘卵母细胞复合体(FEO)为实验模型,利用RNA干扰技术,将MAS赖以产生的酶-羊毛甾醇-14α脱甲基酶(CYP51)的mRNA降解,以观察卵母细胞的促减数分裂能力是否受到影响。23-26d的昆明白小鼠颈椎脱臼处死后取250-350um直径的完整健康卵泡,经显微注射将干扰分子(阳性和阴性分子)注入卵泡腔(浓度5μg/ul,50pl/卵泡),在常规条件下培养于无血清的MEM培养更多还原