脐带血与外周血NKT细胞的体外扩增及其表型比较

【作者】 刘嬿； 范华骅； 高跞； 聂晓绚； 杨懿铭； 陆华中； 高峰；

【机构】 上海市血液中心血液工程研究室；

【摘要】 <正>目的建立体外有效扩增脐带血与外周血NKT细胞的方法及其表型差异的研究。方法 1．脐带血单个核细胞(UCB-MNCs)的制备新鲜采集的正常人脐带血以ACD-B抗凝血袋收集,继以体积比4:1加入6％HES液中,吹打均匀后4℃下静置1小时,吸取中间白膜层用0．6％ACD-PBS 对倍稀释,混匀后以2:1的比例加入Ficoll上层,离心(2000rpm,20min),取中间细胞环,PBS洗3 次,悬浮于含10％FCS的完全培养液中。2．外周血白膜和单个核细胞(PB-MNCs)的制备采自健康献血着的200mL全血,离心制备白膜(2400rpm,14min),用PBS对倍稀释,混匀后以2:1的比例加更多还原