L-抗坏血酸对氧化低密度脂蛋白损伤人脐静脉内皮细胞保护作用的实验研究

【作者】 张泉三； 董果雄； 张社华；

【机构】 青岛大学医学院附属医院心内科；

【摘要】 目的研究氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)产生损伤作用的特征及L-抗坏血酸对该损伤的保护作用,并探讨其可能的分子机制。方法在培养HUVECs的基础上,应用不同浓度的ox-LDL和L-抗坏血酸进行干预,观察其对激动剂乙酰胆碱(Ach)诱导的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性及一氧化氮(NO)生成量的影响,并分析二者的相关性;同时测定细胞内、外乳酸脱氢酶(LDH)的活性及细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量。结果(1)ox-LDL能降低eNOS活性,减少NO的生成量,二者均具有剂量-依赖效应。直线相关性分析显示,eNOS活性与NO的生成量呈正相关(r1=0.8480,p<0.05)。(2)不同剂量L-抗坏血酸(100,300umol/l)能减轻ox-LDL对eNOS活性的影响,增加NO的生成量;直线相关性分析显示,eNOS活性与NO的生成量之间呈显著正相关(r2=0.9884,p<0.01;r3=0.8802,p<0.05)。(3)ox-LDL能提高细胞培养液中LDH活性,增加细胞死亡率;L-抗坏血酸可减弱该效应,但该效应并非随着L-抗坏血酸浓度的增加而增加。(4)L-抗坏血酸对细胞内GSH的含量无明显影响。结论(1)ox-LDL对HUVECs有直接毒害作用,甚至引起细胞死亡。(2)ox-LDL对HUVECs、eNOS活性有抑制作用,从而减少NO的生成。(3)L-抗坏血酸对HUVECs脂质氧化损伤有保护作用。由此提示,L-抗坏血酸对内皮细胞的保护作用可为临床改善内皮依赖性舒张功能提供理论依据。更多还原