间充质干细胞复合藻酸盐组织工程化软骨Ⅱ型胶原表达的研究

【作者】 刘磊； 田卫东； 闫征斌； 陈希哲； 李声伟； 陈润良；

【机构】 四川大学华西口腔医学院口腔颌面外科； 天津市人民医院口腔科；

【摘要】 目的探讨以藻酸盐为支架材料,以经体外软骨向诱导的大鼠骨髓间充质干细胞为种子细胞异位成软骨的可能性。方法将32只雄性SD大鼠(体重150～200g)随机分为实验组和对照组两组。实验组分离培养自体骨髓间充质干细胞,传至第3代后经TGF-β等诱导因子诱导10d后与藻酸钠复合,并滴加氯化钙使其成凝胶状后注入大鼠背部皮下。对照组只注入藻酸盐。术后4周、8周分别半数处死动物,取材行组织学、免疫组织化学和原位杂交观察。结果实验组和对照组于术后4周均未有明显软骨形成,实验组术后8周有明显的肉眼可见的软骨形成,常规组织学切片HE染色及奥新蓝特染后发现有大量软骨形成,软骨内仍可见细胞团,软骨细胞周围基质丰富,藻酸盐降解明显,未降解的藻酸盐松散的分布于软骨间。免疫组化及原位杂交均为阳性,在蛋白水平和分子水平上表明已有软骨形成。而对照组则仍未有软骨形成。结论以骨髓间充质干细胞为功能细胞,以藻酸盐为支架材料可以在体内异位成软骨。更多还原