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黏质沙雷氏菌L15-2几丁质酶的分离纯化与性质研究

Research on Isolation and Purification of Chitinase Produced by Bacterium L15-2 and Its Properties

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【作者】 陈明孙昌魁程剑锋李强张玉臻

【Author】 Chen Ming, Sun Changkui, Cheng Jianfeng, Wang Ximeng , Zhang Yuzhen (State Kkey Llaboratory of Mmicro- biotechnology, Shandong University, Jinan 250100)

【机构】 山东大学微生物技术国家重点实验室

【摘要】 几丁质酶高产菌株黏质沙雷氏菌L15-2在含有1%胶体几丁质、0.3%K2HPO4、0.3%KH2PO4、0.05%MgSO4、0.05%CaCl2、0.001%FeSO4的产酶培养基中37℃培养4 天后,粗酶液经过DEAE Sepharose Fast Flow和Sephadex G-100,电泳检测得到电泳纯的几丁质酶。该酶的性质特征测定结果表明,该几丁质酶的分子量为41.314kD;最适作用温度为50℃,最适作用pH为6.6:在60℃之前热稳定性较好,在pH4-10范围内较稳定;各种金属离子对酶活力影响不同,Fe2+、Zn2+抑制作用明显,而Ba2+、Mn2+、Ca2+对酶活性有一定的促进作用。几丁质酶对致病真菌的抑制作用也很明显。

【Abstract】 Serratia marcesens L15-2 which produces chitinase highly was isolated by the double layer plates containing chitin. The optimal fermentation medium composed 1% chitin, 0.3% K2HPO4, 0.3%KH2PO4, 0.05%MgSO4, 0.05%CaCl2, 0.001%FeSO4. After fermentation for 4 days at 37℃ and purification, the purified chitinase can be tested by SDS-PAGE. The initial temperature is 50℃ and pH is 6.6, The enzyme is stable below 60℃ and between pH 4-10. Different metal ions show different effects on the enzyme activity. The chitinase can be enhanced by Ba2+, Mn2+ and Ca2+ and inhibited by Fe2+ and Zn2+. The chitinase also has an obvious effect on restraining the growth of epiphyte.

  • 【会议录名称】 中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集
  • 【会议名称】中国资源生物技术与糖工程学术研讨会
  • 【会议时间】2005-07
  • 【会议地点】中国山东济南
  • 【分类号】Q936
  • 【主办单位】山东微生物学会、山东大学微生物技术国家重点实验室、中国微生物学会基础微生物学专业委员会
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