蛋白质组学关键技术的创新、改进和应用

【作者】 刘少君； 丁勤学； 郭尧君； 王光辉； 贾宇峰； 赵从建； 阙海萍； 林秋霞；

【机构】 军事医学科学院基础医学研究所； 中国科学院生物物理研究所； 中国科学院化学研究所；

【摘要】 <正> 蛋白质组学技术是开展蛋白质组学研究的关键。但是蛋白质组学研究的技术瓶颈限制了该技术的应用。我们在建立了从蛋白质样品制备到MALDI-TOF分析的一整套神经蛋白质组学技术的基础上,就蛋白质组学技术几个关键瓶颈环节进行创新和改进,获得较为满意的效果:(1)三步法提取蛋白质:可溶蛋白点达2600多个,膜蛋白达492个,沉淀蛋白120多个,国际上报道约14个:(2)进行了从蛋白质提取、1D、2D到染色多个环节的技术控制,使重复性得到突破,2-DE电泳胶蛋白点的匹配率达到98%,蛋白点量的相关性在0.98,使此项技术达到了实用水平,也使通过比较蛋白质组学技术更多还原