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HBV靶向核糖核酸酶及突变体的原核表达和RNase活性分析
【作者】 李英辉； 刘军； 薛采芳； 丁劲； 赵亚； 黄豫晓； 宫卫东；
【机构】 第四军医大学病原生物学教研室；
【摘要】 <正> 目的研究原核表达的HBV靶向核糖核酸酶(HBV核心蛋白与人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素的融合蛋白)及其突变体(点突变失去核酸酶活性)的RNase活性。方法首先,将构建好的靶向核糖核酸酶(TR)及突变体(TRm)基因克隆入原核表达载体pET32a(+),转化入大肠杆菌BL21(DE3)。以IPTG诱导融合蛋白的表达,经过包含体纯化、Ni2+亲和层析柱纯化,并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。纯化的蛋白用透析的方法复性。后以hepG2细胞总RNA和Yeast tRNA为作用底物,应用复
【基金】 国家自然科学基金(No. 30100157);全军医药卫生科研基金(No. 01MA184);第四军医大学创新工程(No. CX99005)
- 【会议录名称】 第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编
- 【会议名称】第6次全国微生物学与免疫学大会
- 【会议时间】2004-12
- 【会议地点】中国浙江绍兴
- 【分类号】R346
- 【主办单位】中华医学会微生物学与免疫学分会