绿色荧光蛋白基因标记细胞体内研究模型的建立和应用

【作者】 江千里； 王健民； 温丽敏； 胡晓霞； 周虹； 费新红； 许小平； 江汕；

【机构】 第二军医大学附属长海医院血液科； 南京医科大学病理教研室；

【摘要】 <正> 目的:建立一套较完备的可进行长期系统观察的GFP基因标记细胞体内研究模型。方法:制备高滴度的绿色荧光蛋白基因(eCFP)标记的逆转录病毒载体,离心法或流动转染法高效感染小鼠P388细胞,有限稀释法获得eGFP~+的细胞克隆;体外观察基因导入对细胞特性的影响;将P388-eGFP细胞接种于DBA/2小鼠体内,分别利用流式细胞仪、荧光显微镜、冰冻切片、组织细胞半固体集落培养和更多还原