I3C对血管平滑肌细胞生长动力学的影响

【作者】 杨刚； 黄晶； 江永红； 苟怀宇； 邓昌明； 刘地川； 王亚平； 高大中； 胡蓉；

【机构】 重庆医科大学第二临床医学院心内科； 重庆医科大学组胚教研室；

【摘要】 目的观察吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol I3C)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和凋亡的影响,探讨13C防治血管再狭窄(RS)的可行性。方法将VSMCs置于含有10-800μM I3C的培养基中进行培养。分别在加药后12、24、36、48、72、96、120小时用MTT支检测VSMCs的增殖活力;记数VSMCs在I3C作用3周后形成的克隆数;细胞免疫化学法观察I3C作用细胞72小时后细胞增殖核抗原(PCNA)的表达;用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测药物作用72小时后VSMCs的凋亡率。结果加药120小时后50-400μM组MTT A值显著低于对照组(0.783±0.029,0.682±0.035,0.566±0.024,0.363±0.016vs.0.821±0.014,P<0.05或P<0.01),各实验组细胞的生长曲线均有减缓且随I3C浓度的增加,减缓更趋明显,其中以400μM组细胞生长减缓最为显著。药物作用72小时后50μM以上药物组VSMCs中PCNA阳性表达率低于对照组[(75.3±0.6)%,(46.5±0.3)%,(87.6±0.5)%,(25.26±0.3)%vs.(96.8±0.7)%,P<0.05或0.01]。50μM组及更高浓度组于加药72小时后都出现显著的VSMCs凋亡[(34.7±3.3)%,(50.5±3.5)%,(61.6±3.1)%,(80.5±2.3)%vs.(3.5±0.5)%,P<0.05或0.01];细胞克隆实验则显示药物作用3周后,25μM组与对照比较即有显著差异(25,53,109vs.35,79,173,P<0.05)。各实验中当I3C浓度达到800μM时VSMCs在36小时内全部死亡。结论I3C对抑制VSMCs的增殖和诱导细胞的凋亡有显著的作用;在一定范围内,I3C的浓度越高对VSMCS的增殖抑制和凋亡诱导作用就越强;提示浓度合适的I3C可能防止再狭窄的发生。更多还原