大鼠急性缺血心肌组织中缺氧诱导因子1α表达的研究

【作者】 朱健华； 周娟； 丁斐； 潘闽；

【机构】 南通医学院附属医院心内科； 南通医学院生物技术系；

【摘要】 目的了解HIF1αmRNA和蛋白质在大鼠急性缺血心肌组织中表达的变化规律,探讨其意义。为今后用HIF1α进行血管再生治疗,促进缺血心肌的供血提供理论依据。方法雄性清洁级SD大鼠78只。采用20%的乌拉坦腹腔麻醉,通过结扎大鼠左冠状动脉前降支,构建左室心肌缺血模型。其中42只大鼠随机分为7组,每组6只,分别设为空白对照组(0h)和缺血0.5h、1h、1.5h、2h、3h、4h组,检测HIF1αmRNA表达。另外36只大鼠随机分为6组,每组6只,分别设为空白对照组(Oh)和缺血1h、2h、4h、5h、6h组,检测HIF1α蛋白表达。术中心电图等证明结扎成功后,不同的大鼠分别在上述不同时间点取缺血心肌组织。一部分用10%中性甲醛和2.5%戊固定后分别用于免疫组化和电镜观察,一部分经液氮中速冻保存待测。运用逆转录聚合酶链式反应(RR-PCR)法检测缺血心肌组织中HTF1amRNA的表达情况。免疫组织化学方法检测缺血氦肌HTF1a蛋白质的表达变化。采用stata4.0统计分析软件对实验结果进行单因素方差统计学分析。所有数据均以x±s表示。结果电镜揭示术后心肌呈缺血改变。HIF1αmRNA和蛋白质在正常大鼠心肌中微量表达,心肌缺血后表达明显增高。0.5h HIF1αmRNA表达显著增加(P<0.05),1-2h达到高峰(P<0.01),以后逐渐下降,缺血4h时已基本趋向基线。HIF1α蛋白质表达主要分布于细胞核,心肌缺血后1h HIF1α蛋白质表达明显上升(P<0.05),4h达到高峰(P<0.01),随缺血时间延长表达回降。术后电镜显示心肌呈缺血改变。结论HIF1α在急性缺血心肌组织中表达明显增高,其表达随缺血时间而变化。HIF1α在大鼠缺血心肌组织中表达的上调,可能参加了心肌缺血的代偿机制,并通过激活下游缺氧相关基因而进行生理性调节,有助于改善心肌供血。更多还原