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大肠杆菌对氟苯尼考分子耐药机制的研究
【机构】 中国农业大学动物医学院；
【摘要】 利用原核表达体系对贡献大肠杆菌对氟苯尼考、氯霉素及甲砜霉素交叉耐药的floR基因进行表达研究。将克隆到pGEX-4T-2表达载体的floR基因片段在BL21-coden plus(DE3)-RP中诱导表达。SDS-PAGE分析结果表明表达蛋白片段的分子量约为34kDa,Western-blotting也证实原核表达系统成功表达了该蛋白片段。通过免疫小鼠制备出该片段的抗体。ELISA结果表明原核表达的FloR蛋白胞外片段具有良好的免疫原性。通过修改的免疫印迹方法、利用制备的抗体对细菌表达的FloR蛋白进行蛋白定位,结果显示FloR蛋白位于细菌的外膜蛋白上。HLPC方法检测菌体内的药物浓度,确定FloR蛋白在细胞膜上贡献对药物的主动泵出机制。
【基金】 国家自然科学基金资助(30170715)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集（下册）
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会
- 【会议时间】2004-09
- 【会议地点】中国北京
- 【分类号】S852.61
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会