猪圆环病毒2型感染后PBMCs中IL-2mRNA的动态变化

【作者】 司兴奎； 何芳； 周双海； 郑洁； 郭鑫； 陈艳红； 杨汉春；

【机构】 中国农业大学动物医学院；

【摘要】 通过RT-PCR技术从猪外周血单核细胞（PBMCs）中扩增和克隆了猪细胞因子IL-2338bp的部分序列,并得到pGEMT-IL2质粒;在pGEMT-IL2基础上利用反向PCR技术构建了缺失92bp的pGEMT-dIL-2 cDNA竞争质粒。对pGEMT-dIL2质粒进行10-7倍稀释后同2×10⁵-2¹⁰×10⁵倍系列的pGEMT-IL2质粒采用同一对引物进行竞争PCR,将产物在2%琼脂糖凝胶上电泳后,采用KodakKDS1D3.0软件进行分析后,以338bp片段同246bp片段的分子个数比的对数值作纵坐标,以不同稀释倍数pGEMT-IL2质粒的分子个数的对数值为横坐标建立了直线回归方程,其相关系数为0.95。采用该直线回归方程对人工感染猪圆环病毒2型（PCV2）SPF猪后3、7、10、14、21、28、35和42天PBMCs中IL-2 cDNA变化的分析结果表明,感染后21天IL-2 cDNA上升,至28天出现峰值,至35天基本回复到初始水平,而后进一步攀升至42天,且攻毒组同对照组在感染后14和21天IL-2 cDNA水平经t试验分析结果表明差异极显著（P<0.01）。更多还原