人体脂肪基质细胞多向分化潜能研究

【作者】 陈希哲； 林云锋； 田卫东； 陈润良； 李声伟；

【机构】 四川大学华西口腔医学院颌面外科；

【摘要】 目的:分离培养人体脂肪基质细胞并研究其成骨、成软骨、成肌、成脂及成神经等多向分化潜能。方法:通过脂肪抽吸术获取健康人体脂肪,机械分割后用Ⅰ型胶原酶消化,得到脂肪基质细胞在BGJb培养基中原代培养10d,传代细胞在含有10%胎牛血清及不同添加成分的DMEM/F12培养基中进行成骨、成软骨、成肌、成脂及成神经诱导培养,每日在倒置显微镜下观察细胞形态,细胞爬片用阿尔新蓝、甲苯胺蓝、油红O、Go-mori萘酚磷酸酯法、Von Kossa法进行特殊染色,同时进行Ⅱ型胶原、Myosin单克隆抗体免疫细胞化学染色。结果:经过多向诱导培养的细胞与常规培养的亲本脂肪基质细胞在形态上有明显的差异,成骨诱导培养后细胞显示其胞浆内富含碱性磷酸酶(ALP)颗粒并形成矿化结节;成软骨诱导培养后细胞胞浆内富含蛋白多糖和Ⅱ型胶原;油红O染色显示成脂培养后的细胞内含有红染的脂滴;免疫细胞化学染色显示成肌诱导培养后细胞内有骨骼肌肌球蛋白阳性,结晶紫染色显示经过成神经诱导培养的细胞具有神经胶质细胞独特的星状形态和着色。结论:人类脂肪基质细胞中存在着成体干细胞,在不同的诱导培养条件下具有向骨、软骨、肌肉、脂肪及神经等多向分化潜能,脂肪组织可能成为人体最大的成体干细胞库。更多还原