黄鳝三种类型GnRH的克隆和表达的组织分布

【作者】 张利红； 张为民； 岑欣； 张扬； 陈振业；

【机构】 中山大学生命科学学院；

【摘要】 黄鳝(Monopteras albus)是一种先雌后雄的淡水性逆转鱼类。我们通过反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA ends,RACE)的方法,从黄鳝下丘脑的总RNA中扩增出三种类型GnRH的全长cDNA。黄鳝的三种GnRH分别是mdGnRH,cGnRH-Ⅱ和sGnRH。黄鳝mdGnRH cDNA全长428 bp,编码的前原mdGnRH由98个氨基酸组成,它包含26个氨基酸的信号肽、10个氨基酸的mdGnRH、3个氨基酸的酶切加工位点(Gly-Lys-Arg)和59个氨基酸的GnRH相关肽。黄鳝cGnRH-ⅡcDNA全长554bp,编码的前原cGnRH-Ⅱ由83个氨基酸组成,包含21个氨基酸的信号肽、10个氨基酸的cGnRH-Ⅱ、酶切加工位点(Gly-Lys-Arg)和49个氨基酸的GnRH相关肽。黄鳝sGnRH cDNA全长657 bp,编码的前原sGnRH由90个氨基酸组成,包含23个氨基酸的信号肽、10个氨基酸的sGnRH、酶切加工位点(Gly-Lys-Arg)和54个氨基酸的GnRH相关肽。我们建立了黄鳝三种GnRH的半定量RT-PCR方法,研究黄鳝GnRH的表达和组织分布。结果表明:mdGnRH在各脑区中均有表达,其中端脑和下丘脑的表达量较高。cGnRH-Ⅱ在嗅球、端脑、下丘脑、视顶盖-丘脑、小脑、延髓和性腺中都有表达,视顶盖-丘脑表达量最高,下丘脑次之。sGnRH在端脑的表达量较高,在嗅球、端脑、下丘脑和视顶盖-丘脑也有表达。而且,mdGnRH、cGnRH-Ⅱ和sGnRH在雌性和雄性黄鳝组织中的表达存在差异。更多还原